青霉素的主要作用就是杀灭细菌，通过阻碍细菌细胞壁的合成，导致细菌膨胀、破裂、自溶而杀死细菌 。也可以治疗病毒感染病症、临床上，青霉素主要用来治疗敏感细菌以及螺旋体导致的感染，如咽炎、扁桃体炎、大叶性肺炎、支气管肺炎、脓胸、感染性心内膜炎、猩红热、疖、痈、丹毒、蜂窝织炎，还有淋病、流脑、白喉、破伤风以及某些败血症等细菌感染 。
青霉素还用来治疗螺旋体病，如梅毒、回归热、钩端螺旋体病，广泛使用的有“阿莫西林” 。2、先锋霉素抗生素也就是头孢菌素，先锋霉素和青霉素作用差不多，先锋与青霉素都属于β-内酰胺类抗生素 二者区别：先锋是头孢菌素的第一代，与青霉素相比抗菌谱广、杀菌力强、对β-内酰胺酶稳定、过敏反应小、与青霉素有交叉过敏反应 。
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