
原理:
PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段 , 使其能有效地扩增模板DNA序列 , 引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否 。
【如何进行pcr引物设计】原则:
引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性 。产物不能形成二级结构 。引物长度一般在15到30碱基之间 。G加C含量在百分之40到60之间 。碱基要随机分布 。引物自身不能有连续4个碱基的互补 。引物之间不能有连续4个碱基的互补 。引物5撇端可以修饰 。引物3撇端不可修饰 。引物3撇端要避开密码子的第3位 。
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